胎牛血清使用中,您可能遇到的問題....... 如何儲(chǔ)存和解凍血清不會(huì)使血清品質(zhì)受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃使之融解,然后在室溫下使之全融。
但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
長時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。
因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過1個(gè)月。
若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響品質(zhì)。
如要除去沉淀,離心(400g,1-2分鐘)或讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一無菌瓶中(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。
所以,使用時(shí)搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1) 解凍血清時(shí),請(qǐng)隨一邊解凍,一邊搖勻,使溫度及成分均一,減少沉淀產(chǎn)生。
(2) 血清分裝凍存時(shí),規(guī)則搖均(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,易使蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清品質(zhì)。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,無須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且一邊熱滅火,一邊搖勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。
因?yàn)榭股睾脱逯械囊恍┏煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。