簡要描述:miRNA定量檢測 MicroRNA(miRNA)是一類長度約19-24nt的非編碼單鏈RNA,通過堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式與靶基因的3'-UTR區(qū)部分或*互補(bǔ),剪切靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物或者抑制轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的翻譯,從而起到轉(zhuǎn)錄后調(diào)控靶基因表達(dá)的作用。它廣泛存在于動(dòng)物、植物、真菌及病毒的基因組中,調(diào)控生物體生長發(fā)育和疾病發(fā)生等過程中相關(guān)基因的表達(dá)。
miRNA定量檢測服務(wù):
MicroRNA是一類長度約19-24nt的非編碼單鏈RNA,通過堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式與靶基因的3'-UTR區(qū)部分或*互補(bǔ),剪切靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物或者抑制轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的翻譯,從而起到轉(zhuǎn)錄后調(diào)控靶基因表達(dá)的作用。它廣泛存在于動(dòng)物、植物、真菌及病毒的基因組中,調(diào)控生物體生長發(fā)育和疾病發(fā)生等過程中相關(guān)基因的表達(dá)。MiRNA的異常表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致生理狀態(tài)的異常和疾病的產(chǎn)生,在多種癌癥中,miRNA的表達(dá)水平會(huì)發(fā)生明顯改變,有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外,在許多其他的病變組織和細(xì)胞中也檢測到了miRNA的異常表達(dá)。因此對(duì)miRNA的表達(dá)的研究具有重要意義。
MiRNA的實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time quantitative PCR)檢測
運(yùn)用成熟的實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)準(zhǔn)確、快速地定量檢測各種組織、原代細(xì)胞及細(xì)胞系中目的microRNA的表達(dá)情況,具有靈敏度高、實(shí)驗(yàn)周期短和特異性高等特點(diǎn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖1和圖2。
目的miRNA和內(nèi)參(U6 snRNA)的擴(kuò)增曲線
目的miRNA和內(nèi)參(U6 snRNA)的熔解曲線
miRNA定量檢測送樣要求:
細(xì)胞(≥106)、組織(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等樣品材料,總RNA(≥20μl,濃度≥ 50ng/μl)。